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如何使elisa試劑盒反響值添加?

更新時(shí)間:2021-11-16      瀏覽次數(shù):1328
  今天小編教您如何才能使elisa試劑盒反響值添加?都要注意些什么呢?
 
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)在必定溫度下的反響時(shí)刻并不是反響的結(jié)尾,溫育時(shí)刻過(guò)短、溫度過(guò)低,易致顯色不全;溫育時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)、溫度過(guò)高,易致非特異性緊附于反響孔周圍,難以清潔*,發(fā)生陰性高值或假陽(yáng)性反響。
 
  要嚴(yán)厲按規(guī)則的溫度和溫育時(shí)刻進(jìn)行。如果參加的酶物過(guò)多或加在較高的孔壁上或孔口,也會(huì)致使本底添加或假陽(yáng)性。
 
  水浴箱門,嚴(yán)厲控制水浴的溫度為37±0.5。同時(shí),微孔板不可堆疊放置,以確保傳熱均勻,各板的溫度都能敏捷到達(dá)平衡。
 
  當(dāng)標(biāo)本收集保留不妥發(fā)生溶血時(shí),紅細(xì)胞中的血紅蛋白釋放到血清中,血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶的性質(zhì),其通過(guò)吸附或“PP效應(yīng)"(蛋白質(zhì)間相互吸附的景象)后,可催化A、B液顯色而形成假陽(yáng)性。
 
  因?yàn)樵噭┖幸话阍O(shè)定的反響溫度為37度,在這個(gè)溫度下溫育必定時(shí)刻,蒸騰的水分會(huì)許多,關(guān)于全部反響系統(tǒng)來(lái)講,各種反響物的濃度會(huì)不斷地添加,這么必會(huì)致使反響z終的值添加。
 
  如果ELISA試劑盒樣品稀釋液少加或血清多加,都會(huì)致使本底增高。關(guān)于間接法來(lái)說(shuō),受上述兩個(gè)因素影響更大。
 
  因?yàn)檠逯惺軝z的特異性IgG只,IgG中的一小有些。IgG的吸附性很強(qiáng),非特異性IgG可直接吸附到固相載體上,有時(shí)也可吸附到包被抗原的外表。
 
  這些非特異性的IgG均能夠和酶標(biāo)二抗發(fā)作反響而形成較高陰性本底或假陽(yáng)性。假如參加的血清過(guò)多,高于規(guī)則的稀釋倍數(shù),很容易形成高值陰性。反之,形成假陰性。
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